現(xiàn)在臨床PCR實(shí)驗(yàn)室使用的試劑大部分都是各生產(chǎn)企業(yè)提供的商品化的試劑盒，那么試劑質(zhì)量的好壞直接決定了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的好壞，而不同廠家試劑的性能、質(zhì)量和價(jià)格千差萬(wàn)別，如何選擇一款合適的試劑對(duì)每個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)室都至關(guān)重要，一般來(lái)說(shuō)，選擇試劑主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行評(píng)價(jià)：

1、重復(fù)性  

首先，試劑檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性直接展現(xiàn)了試劑的方法學(xué)及其質(zhì)量的好壞，是評(píng)價(jià)試劑好壞最明顯、最直接的指標(biāo)。  

其次，必一運(yùn)動(dòng)在此說(shuō)的試劑重復(fù)性是指對(duì)原始樣本檢測(cè)的重復(fù)性，而不是對(duì)某一個(gè)樣本提取的核酸進(jìn)行重復(fù)性的檢測(cè)和評(píng)價(jià)。  

最后，試劑的重復(fù)性對(duì)于療效檢測(cè)、用藥指導(dǎo)有著重大的意義，一個(gè)重復(fù)性好的試劑，往往能夠在病人的抗病毒治療過(guò)程中，給醫(yī)生和病人提供最直接、最可靠的數(shù)據(jù)，讓醫(yī)生和病人對(duì)疾病進(jìn)展有更清楚的認(rèn)識(shí)，從而制定合理的治療方案，實(shí)現(xiàn)更好的治療效果。

2、靈敏度  

一個(gè)試劑的靈敏度往往能夠體現(xiàn)該試劑的技術(shù)水平和先進(jìn)程度，同時(shí)對(duì)于臨床病癥的監(jiān)測(cè)有著舉足輕重的意義。以乙肝為例來(lái)說(shuō)，我國(guó)的乙肝復(fù)發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于發(fā)達(dá)國(guó)家，同時(shí)由乙肝病毒感染轉(zhuǎn)換為慢性肝炎、肝硬化、肝癌的患者也居世界前列，這很大程度上與對(duì)低載量病毒監(jiān)控的嚴(yán)重不足有關(guān)。美國(guó)肝病學(xué)會(huì)專(zhuān)家組就提出，對(duì)乙肝抗病毒治療過(guò)程中，HBV DNA的最低監(jiān)測(cè)點(diǎn)應(yīng)設(shè)置為10IU/ml，而歐洲和亞太肝病學(xué)也指出HBV DNA病毒載量應(yīng)該盡可能小于10IU/ml。這都足以證明，高靈敏度對(duì)于用藥治療、病程監(jiān)控等起著巨大的作用，靈敏度越高，對(duì)于疾病的監(jiān)控效果更好，對(duì)于確定治療的終點(diǎn)，具有積極的指導(dǎo)作用。

3、定量準(zhǔn)確性  

對(duì)于臨床檢測(cè)中定量項(xiàng)目來(lái)說(shuō)，試劑盒定量的準(zhǔn)確性是非常重要的，也是評(píng)價(jià)定量試劑盒的一個(gè)重要指標(biāo)之一。衛(wèi)生部每年都會(huì)有2次全國(guó)性的室間質(zhì)評(píng)，通過(guò)質(zhì)評(píng)結(jié)果可以很好的看出試劑盒定量的準(zhǔn)確性。  但往往很多時(shí)候，實(shí)驗(yàn)室在選擇試劑的時(shí)候都偏重與過(guò)去的試劑盒比較定量結(jié)果的差異，并以過(guò)去的試劑盒定值作為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)參考和評(píng)價(jià)一種新試劑，其實(shí)這種方法不完全可取。不過(guò)可以通過(guò)同時(shí)檢測(cè)衛(wèi)生部的質(zhì)控品來(lái)進(jìn)行比較，這樣才使得兩種試劑在同一客觀標(biāo)準(zhǔn)上進(jìn)行PK，得到合理公平的評(píng)價(jià)。  

同時(shí)，要驗(yàn)證一個(gè)試劑的定量是否準(zhǔn)確，必一運(yùn)動(dòng)可以采用一個(gè)高濃度樣本，用陰性血清依次進(jìn)行10倍梯度的稀釋?zhuān)缓筮x取多家試劑公司的產(chǎn)品進(jìn)行同步檢測(cè)PK，考察各公司試劑對(duì)樣本定值的實(shí)際值與理論值的差異，即可判斷各公司試劑定量準(zhǔn)確與否。 

4、有無(wú)內(nèi)標(biāo)監(jiān)測(cè)  

內(nèi)標(biāo)的一個(gè)最主要的作用就是控制假陰性結(jié)果的發(fā)生，但在國(guó)內(nèi)臨床檢測(cè)中往往被忽視了，這主要與兩個(gè)方面有關(guān)，一個(gè)是之前國(guó)內(nèi)使用的很多熒光定量PCR儀均為單通道的儀器，無(wú)法進(jìn)行多色熒光的檢測(cè)；國(guó)內(nèi)外PCR行業(yè)對(duì)內(nèi)標(biāo)的研究已不是一個(gè)新興課題，目前國(guó)內(nèi)PCR行業(yè)能把內(nèi)標(biāo)做得非常好的科研單位或商業(yè)化的PCR試劑廠家寥寥無(wú)幾，這正體現(xiàn)了這一技術(shù)的難度。  

在臨床檢測(cè)中，內(nèi)標(biāo)的作用非常重要。在臨床檢測(cè)過(guò)程中，怎么做到每一個(gè)陰性結(jié)果均為真正的陰性結(jié)果，從而杜絕因擴(kuò)增抑制而出現(xiàn)的假陰性結(jié)果呢？?jī)?nèi)標(biāo)的加入就能夠很好的防止假陰性結(jié)果了，加入必一運(yùn)動(dòng)做了一個(gè)樣本，它的目標(biāo)檢測(cè)熒光為陰性，內(nèi)標(biāo)檢測(cè)熒光也為陰性，那么這個(gè)樣本的擴(kuò)增則受到了抑制，該陰性結(jié)果為假陰性，必一運(yùn)動(dòng)必須對(duì)該樣本進(jìn)行復(fù)檢。如果試劑沒(méi)有內(nèi)標(biāo)的話，必一運(yùn)動(dòng)則不能很好的判斷該結(jié)果是否正常？是否可以發(fā)報(bào)告？在發(fā)報(bào)告時(shí)，必一運(yùn)動(dòng)無(wú)法保證發(fā)出去的結(jié)果百分之百的準(zhǔn)確；內(nèi)標(biāo)的加入，就可以解決必一運(yùn)動(dòng)這方面的煩惱。目前，衛(wèi)生部的專(zhuān)家也在大力推崇內(nèi)標(biāo)的重要性，也是為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

5、線性定量范圍  

試劑盒的線性定量范圍指的是試劑盒最低檢測(cè)下限和最高檢測(cè)上限之間的范圍，范圍越寬說(shuō)明試劑盒性能越好。

6、UNG酶防污染體系  

PCR反應(yīng)過(guò)程中， 1個(gè)拷貝的DNA經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后，可以增長(zhǎng)到10億個(gè)拷貝的產(chǎn)物DNA， 極微量的PCR 產(chǎn)物污染，就可能造成假陽(yáng)性，因而這是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。尿嘧啶糖苷酶（UNG）法：將PCR 產(chǎn)物中的dT用dU 代替。這種dU 化的PCR 產(chǎn)物與UNG 一起孵育，因UNG 可裂解尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架間的N-糖基鍵，可除去dU 而阻止TaqDNA 聚合酶的延伸，從而失去被再擴(kuò)增的能力。UNG 對(duì)不含dU 的模板無(wú)任何影響，UNG 可從單或雙鏈DNA 中消除尿嘧啶，而對(duì)RNA 中的尿嘧啶和單一尿嘧啶分子則無(wú)任何作用。  

此外，試劑的穩(wěn)定性、批間差、溯源性（是否溯源于WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品）等也都是考察一款試劑盒質(zhì)量重要指標(biāo)。